Облепиха

 Облепиха, Hippophae rhamnoides 

Hippophae rhamnoides L. (семейство Elaeagnaceae, обычное название - облепиха) - цветущий, колючий, азотфиксирующий лиственный кустарник, произрастающий в холодных засушливых регионах произрастающий в регионах Евразии с умеренно холодным климатом. Ягоды, семена и листья растения широко используются в народной медицине для лечения гипертонии, отеков, воспалений, регенерации тканей, кожных трансплантатов, ожогов, травм, ран и язв. Облепиха (Hippophae rhamnoides L.) недавно получила всемирное признание благодаря своему фармацевтическому и нутрицевтическому потенциалу и в настоящее время культивируется в нескольких частях мира. Hippophae rhamnoides, также называемая облепихой, широко используется в качестве лечебного растения и пищевой добавки в России, Европе и Азии. Hippophae rhamnoides L. естественным образом распространен в различных регионах Северо-Западных Гималаев (2590–4175 м над уровнем моря), в Химачал-Прадеше (районы Лахаул-Спити и Киннаур) и Джамму и Кашмир (районы Ладакх и Каргил) и занимает площадь 11 500 га. в Ладакхском регионе Индии.  Данные показывают, что изменение высоты может определять антиоксидантный потенциал облепихи. Различия в антиоксидантной активности среди исследованных сортов подчеркивают жизненно важную роль, которую играет генетический фон и географическое положение для определения количества полезных для здоровья соединений. Была обнаружена значительная корреляция между общей антиоксидантной способностью, содержанием аскорбиновой кислоты, легкостью плодов, высотой растений и географическим положением, что указывает на взаимосвязь между географическими, морфологическими и биохимическими признаками. Тибетцы использовали гиппофов для лечения сердечно-сосудистых заболеваний более тысячи лет. Фармакологическая оценка подтвердила этномедицинские биологические действия и другие полезные эффекты H. rhamnoides на кожу с использованием научно принятых протоколов и средств контроля, хотя некоторые исследования требуют более детальных исследований. Ее полное применение в дерматологии можно объяснить наличием множества флавоноидов, витаминов и ненасыщенных жирных кислот. Широкое использование растения в традиционной системе для дерматологического аспекта требует дальнейшей комплексной фитохимической работы, основанной на его фактическом использовании традиционным населением. Демонстрация растения в традиционной системе, фармакологии, космецевтике не только требует его дальнейших терапевтических исследований, но также требует сосредоточения внимания на его выращивании и распространении по всему миру.

Приминение

Фармакологические исследования показали, что облепиха проявляет антибактериальные, противовоспалительные, противогрибковые, антипсориазные, антиатопические дерматитные и ранозаживляющие свойства. Ипользуется при таких заболеваниях как экзема, псориаз, красная волчанка и дерматоз, сердечно-сосудистые заболевания, рак, ожоги, расстройства пищеварительного тракта, противовоспалительные и защитные эффекты от УФ-излучения. Кроме того, он также был включен в различные космецевтики для использования при лечении кожных покровов, сглаживании, омоложении, удалении морщин, шрамов и пигментации, а также при проблемах с волосами. 

Биохимия

Ягоды облепихи - богатый источник белков и нескольких незаменимых аминокислот. Они также содержат различные минералы, такие как Ca, P, Fe и, в основном, калий, который встречается в больших количествах, чем другие элементы. Фитохимические исследования показывают присутствие широкого спектра соединений, таких как флавоноиды, каротиноиды, полиненасыщенные жирные кислоты, минералы, витамины, омега-3, 6, 9 и самые редкие омега-7, а также около 190 биологически активных соединений. Плоды гиппофы также обильно богаты витаминами, такими как фолиевая кислота, B1, B2, K и витамин C (695 мг/100 г; сравнительно больше, чем лимоны и апельсины), токоферолами (1–10 мг/100 г) и каротиноидами (3 –15 мг/100 г) особенно β-каротин, ликопин, зеаксантин. Органические кислоты, такие как яблочная и хинная кислоты; и щавелевая, лимонная и винная кислоты также присутствуют во фруктах. Производные изорамнетина составляли более 65% от общего количества флавонолов, но также определялись производные кверцетина и кемпферола. Каротины составляют от 19 до 47%, ксантофиллы - от 16 до 81% от общего количества каротиноидов. Ягоды также содержат большое количество глюкозы и фруктозы от 0,6 до 24,2 г/100 мл. Кожура стебля и ягод содержит 5-гидрокситриптамин, что редко встречается среди растений. Химический состав ягод облепихи существенно различается в зависимости от их происхождения, климата, размера и зрелости плодов, а также метода обработки. Ягоды гиппофа обладают одной из самых высоких антиоксидантных активностей среди лекарственных растений (Xu et al., 2017), содержащих аскорбиновую кислоту в качестве основного антиоксиданта наряду с токоферолами, каротиноидами и флавоноидами. Облепиха является богатым источником флавоноидов с самым высоким содержанием изорамнетина, за которым следуют изорамнетин-3-O-13-D-глюкозид, рутин, устзагалин, кверцетин, мирицетин и кемпферол. Плоды также содержат ненасыщенные жирные кислоты (олеиновая кислота, линолевая кислота, линоленовая кислота) наряду с фитостеринами, такими как β-ситостерин, эргостерин и амирины. Свежие листья облепихи богаты каротиноидами (26,3 мг / 100 г) и общим хлорофиллом (98,8 мг / 100 г), что делает их сопоставимыми с зелеными овощами, а сушеные листья также содержат биоактивные соединения в больших количествах по сравнению с обычно потребляемыми овощами. (Гуан, Ченковски и Хайдамака, 2005 г.). В листьях также содержится много белков (20,7%), аминокислот (0,73% лизина, 0,13% метионина и цистина), минералов (Ca, Mg и K), фолиевой кислоты, катехинов, этерифицированных стеринов, три-терпенолов и изопренолов. . Танины гиппофенины A и B также были выделены из листьев облепихи.

Флавоноиды, а также жирные кислоты, присутствующие в различных частях облепихи, могут предотвратить ишемическую болезнь сердца и облегчить симптомы сахарного диабета и рака. Производные изорамнетина обладают разными биологическими свойствами (например, антиоксидантными, антитромбоцитарными и антикоагулянтными). Тестируемые соединения можно рассматривать как новые природные полезные соединения, которые можно использовать для профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний. У мышей, которым вводили белок облепихи, наблюдалось очевидное снижение массы тела и уровня глюкозы в крови. Выздоровели популяции Bifidobacterium, Lactobacillus, Bacteroides и Clostridium coccoides. Амплификация области V3 гена 16S рДНК показала, что виды кишечных микробов в экспериментальной группе были в определенной степени скорректированы. Анализ, проведенный ARDRA, подтвердил, что белок облепихи может увеличивать диабет 2 типа у мышей по разнообразию кишечных микроорганизмов. 

На мужских и женских растениях облепихи (Hippophae rhamnoides L.), собранных в конце весны, изучен профиль липофильных антиоксидантов в различных вегетативных частях (листьях, побегах, почках и ягодах). Пять липофильных соединений, то есть три гомолога токоферола (α, β и γ), пластохроманол-8 и β-каротин, были идентифицированы в каждой вегетативной части мужских и женских растений облепихи в следующих концентрациях: 7,25–35,41, 0,21–2,43, 0,41–1,51, 0,19–1,79 и 4,43–24,57 мг/100 г сухого веса. Кроме того, в бутонах были обнаружены значительные количества -токотриенола (1,99 мг / 100 г сухого веса). Α-токоферол и β-каротин были преобладающими липофильными антиоксидантами в каждой вегетативной части, составляя 78,3–97,0% идентифицированных соединений. Наибольшее количество липофильных антиоксидантов обнаружено в листьях, особенно женских растений. Тем не менее, помимо листьев, также побеги растений обоих полов, по-видимому, являются хорошим источником α-токоферола и β-каротина.

Гомогалактуронан (HRWP-A)  с высоким содержанием метоксильных групп выделенный из облепихи (ippophae rhamnoides) оказывает противоопухолевое действие in vivo. Структурный анализ показал, что HRWP-A представляет собой полисахарид с повторяющимися единицами (1 → 4) -β-d-галактопиранозилуроновых остатков, из которых 85,16% этерифицированы метильными группами. Анализ противоопухолевой активности показал, что HRWP-A может значительно ингибировать рост карциномы легких Льюиса. Дальнейшие эксперименты показали, что противоопухолевый эффект HRWP-A может быть опосредован иммуностимулирующей активностью, поскольку он усиливает пролиферацию лимфоцитов, увеличивает активность макрофагов, а также способствует активности NK-клеток и цитотоксичности CTL у мышей с опухолями. Различные биологические активные вещества, такие как кверцетин, кемпферол, изорамнетин и мирицетин, способны регулировать метаболизм липидов.

В настоящее время не только ягоды, но и листья привлекают внимание ученых из-за наличия питательных гидрофильных и липофильных соединений. Более того, сообщалось, что не только листья, но и другие вегетативные части, например побеги, могут быть использованы как ценный источник фенольных соединений. В последнее десятилетие наблюдается повышенный интерес к использованию фенольных соединений из нетрадиционных источников, а также к липофильным антиоксидантам, таким как токохроманолы, β-каротин и пластохроманол-8. Сообщается, что эти биосоединения, особенно токоферолы и токотриенолы, обладают широким спектром биологической активности, в том числе антиоксидантными и противовоспалительными свойствами. Таким образом, поскольку объем информации о липофильных соединениях в вегетативных частях облепихи (листья, побеги и почки) все еще ограничен или отсутствует, целью этого исследования было оценить их профиль.

Облепиха крушиновидная и ее влияение на сердечно-сосудистые заболевания

Было проведено исследование  для изучения антигипертензивного эффекта общих флавонов, экстрагированных из остатков семян Исследование было разработано для изучения антигипертензивного эффекта общих флавонов, экстрагированных из остатков семян облепихи крушиновидной (Hippophae rhamnoides L. )(ЭФОС-ОК), и его основного механизма у крыс, постоянно получавших сахарозу, путем оценки их способности регулировать уровни инсулина и ангиотензина. Прием пищи с высоким содержанием сахарозы (77% ккал из углеводов, 16% из белка и 6% из липидов, соответственно) в течение 6 недель привело к значительному повышению систолического артериального давления (САД) на 25,60%, инсулина в плазме на 114,24. %, триглицериды на 85,14% и содержание активированного ангиотензина ∥ в сердце и почках. Однако лечение ЭФОС-ОК  значительно подавляло повышенную гипертензию, гиперинсулинемию и дислипидемию. Кроме того, ЭФОС-ОК (особенно в дозе 150 мг/кг/день) повышал уровень ангиотензина в циркулирующей крови так же эффективно, как блокатор рецепторов ангиотензина. Эти результаты показали, что ЭФОС-ОК проявляет свои антигипертензивные эффекты, по крайней мере частично, за счет повышения чувствительности к инсулину и блокирования сигнального пути ангиотензина. Результаты  исследования позволяют предположить, что ЭФОС-ОК может оказаться потенциально полезным при лечении гиперинсулинемии в недиабетическом состоянии с сердечно-сосудистыми заболеваниями.

Гиперлипидемия

 Клинические испытания показали, что сок облепихи снижает риск сердечно-сосудистых заболеваний за счет предотвращения окисления холестерина липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) и повышения уровня холестерина связанного с липопротеинами высокой плотности (ХС-ЛПВП) в крови. Масло плодов облепихи снижает резистентность к инсулину за счет активации сигнального пути PI3K/Akt в клетках при  сахарном диабете 2 типа и у крыс. Сообщалось, что облепиха обладает цитопротекторной активностью против окислительного повреждения, вызванного гипоксией, путем снижения уровней активных форм кислорода (АФК), восстановления целостности митохондрий и предотвращения повреждения ДНК в глиальных клетках. Флавоноиды, такие как изорамнетин (ISOR), кверцетин (QUE) и кемпферол (KAE) и т. д. Являются основными компонентами облепихи. Флавоноиды облепихи (ФО) обладают гиполипидемическими и гипогликемическими свойствами у мышей с ожирением, вызванной диетой с высоким содержанием жиров. ФО защищал индуцированные окисленным липопротеином низкой плотности (ox-LDL) повреждения эндотелиальных клеток посредством модуляции экспрессии эндотелиальной конститутивной NO-синтазы (eNOS) и лектин-подобного рецептора липопротеинов низкой плотности-1 (LOX-1). Поскольку флавоноиды в облепихе сложны, а фармакологические механизмы могут быть задействованы во множестве сигнальных путей, механизм ФО против гиперлипидемии трудно объяснить только традиционными экспериментальными способами.

Обнаружено, что экстракт флавонойдов облепихи заметно снижает накопление липидов в модели стеатоза клеток линии HL7702, индуцированного холестерином. 

Гомеостаз липидов тесно связан с абсорбцией, метаболизмом и преобразованием липидов. Флавонойды облепихи улучшают гиперлипидемию, регулируя несколько путей, таких как метаболизм холестерина, переваривание и всасывание жиров, путь передачи сигналов PPAR, путь передачи сигналов AMPK и резистентность к инсулину, которые играют ключевую роль в развитии гиперлипидемии. Кроме того, эксперименты in vitro показали, что ФО могут увеличивать экспрессию мРНК PPAR-γ, PPAR-α, ABCA1, CPT1A и т.д., а также снижать SREBP-2 и его целевой ген LDLR.

PPAR включают PPAR-α, PPAR-β/δ и PPAR-γ, факторы транскрипции, индуцируемые лигандом, и принадлежат к суперсемейству ядерных рецепторов. Антидиабетические тиазолидиндионы (TZD), включая RSG и троглитазон, сильно активируют PPAR-γ, но их клиническое использование прекращено из-за нежелательных клинических побочных эффектов, таких как увеличение веса, повреждение печени и остеопороз. CPT1A, ген-мишень PPAR-α, способствует β-окислению ЖК в митохондриях. LPL - это фермент, ограничивающий скорость гидролиза липопротеинов, который ускоряет разложение и клиренс липопротеина TG, способствуя гидролизу TG в VLDL и хиломикронах. Активация PPAR-α индуцирует экспрессию переносчиков АТФ-связывающих кассет (ABCA1 и ABCG1), CPT1A и LPL, затем способствует β-окислению ЖК, повышает уровни HDL-c и снижает уровни триглицеридов и TC. Активация PPAR-γ снижает уровень глюкозы в крови, улучшает инсулинорезистентность (ИР) и усиливает метаболизм глюкозы. Двойные агонисты PPAR-α/γ разработаны для повышения чувствительности к инсулину, облегчения дислипидемии без таких побочных эффектов. Интересно, что предыдущие исследования показали, что ФО предотвращают ожирение, вызванное диетой с высоким содержанием жиров, у мышей C57BL / 6 за счет регуляции PPAR-γ и PPAR-α и подавления воспаления в белой жировой ткани. В исследовании обнаружено, что ФО и QUE активируют PPAR-α и γ и его мишени ABCA1 и LPL. Это может быть одной из важных причин, почему ФО могут снижать уровень глюкозы в крови  и уровни липидов без увеличения веса, повреждения печени и других побочных эффектов. Кроме того, CAT и HES активируют CPT1A для улучшения образования АТФ путем β-окисления ЖК в митохондриях. Эти результаты согласуются и предполагают уникальные преимущества ФО по сравнению с агонистами химического синтеза PPAR-γ.

Ядерные рецепторы, LXR, являются генами-мишенями PPAR-α/γ и важными регуляторами липидного гомеостаза. Активация LXR улучшает начальную стадию обратного транспорта холестерина за счет активации его генов-мишеней, таких как ABCG5 и ABCG8. Флавоноиды QUE, CAT и HES активируют LXRα и ABCG5/8, увеличивая отток холестерина. LXRα способствует превращению холестерина в желчную кислоту в печени, увеличивает выведение желчной кислоты с калом и снижает уровень холестерина в плазме, стимулируя экспрессию его гена-мишени CYP7A1, фермента, ограничивающего скорость в пути синтеза желчной кислоты. В нашем исследовании ISOR связывался с PPAR-γ и активировал PPAR-γ/LXRα/CYP7A1. Хорошо известно, что PPAR-γ регулируется PI3K/AKT, однако этот путь не был обогащен в нашем исследовании сетевой фармакологии. Интересно, что ISOR связывается с PPAR-γ и активирует нисходящий путь, предполагая, что PPAR-γ может быть прямой мишенью для ISOR. Это также отражало надежность сетевой фармакологии.

SREBP является основным фактором транскрипции, который контролирует биосинтез холестерина, ЖК и ТГ. Повышенная экспрессия и генетический полиморфизм генов SREBP были связаны с сердечно-сосудистыми заболеваниями. Предыдущие исследования показали, что ингибирование экспрессии гена-мишени SREBP путем блокирования процесса созревания SREBP улучшает липидные профили и оказывает антиатеросклеротический эффект на моделях мышей. Наши результаты показали, что ФО и 4 биоактивных флавоноида CAT, HES, QUE и ISOR подавляют экспрессию мРНК SREBP-2 и LDLR.

Иммунитет

Гомогалактуронан из Hippophae rhamnoides L. Ягоды усиливают иммуномодулирующую активность за счет активации макрофагов путем TLR4 / MyD88.

Результаты исследования показали, что Гомогалактуронан (HRWP-A) может восстанавливать физическое состояние и активировать макрофаги у мышей с иммуносупрессией, вызванной циклофосфамидом (CTX). Далее, мы исследовали возможный механизм, лежащий в основе эффектов HRWP-A на перитонеальных макрофагах мыши. КПЦР и вестерн-блоттинг показали, что HRWP-A усиливает экспрессию мРНК TLR4 in vitro. Этот процесс сопровождался явным увеличением экспрессии MyD88 и p-IκB-α, но эти эффекты в значительной степени отменялись предварительной обработкой антителами против TLR4. Эффекты HRWP-A на продукцию макрофагов NO, IL-1β и IL-6 также ингибировались антителами против TLR4 и находились под сильным влиянием ингибитора NF-κB PDTC. Более того, HRWP-A не смог индуцировать продукцию NO, IL-1β и IL-6 в перитонеальных макрофагах, полученных из мышей C3H/HeJ, которые имеют точечную мутацию в гене Tlr4, что предполагает участие молекулы TLR4 в HRWP- А-опосредованная активация макрофагов. Эти результаты могут иметь важное значение для нашего понимания взаимосвязи структуры и активности иммуностимулирующих полисахаридов из лекарственных трав.

Ожирение

Исследование роли экстракта флавоноидов, полученных из остатков семян hippophae rhamnoides, на мышей с ожирением, вызванным диетой с высоким содержанием жиров.

Было проведено исследование, чтобы изучить активный механизм, лежащий в основе роли флавоноидов которые были получены из остатков семян облепихи (hippophae rhamnoides), флавонойды из семян облепихи (ФСО) в ожирении. Всего было отобрано 50 здоровых мышей самцов и разделено на 5 групп (по 10 мышей в каждой группе), т. е. Нормальная контрольная группа, контрольная группа с высоким содержанием жиров, группа 100 мг/кг ФСО, группа  300 мг/кг ФСО и группа розиглитазона. Были обнаружены основные биохимические показатели мышей, а образцы печени и белой жировой ткани были собраны, окрашены и проанализированы с помощью вестерн-блоттинга для изучения влияния флавоноидов на ожирение. В эксперименте росиглитазон использовался в качестве традиционного препарата для снижения веса, и его эффективность сравнивалась с таковой в группах ФСО. Было обнаружено, что по сравнению с контрольной группой с высоким содержанием жиров, увеличение веса мышей с ожирением, которым вводили ФСО, было замедлено, наряду со снижением уровней общего холестерина в сыворотке, глюкозы в плазме и накопления жира в печени. Между тем, было также обнаружено, что ФСГ может снижать экспрессию  рецептора, активируемого пролифератором пероксисом γ  (PPARγ) в печени и белой жировой ткани, тем самым помогая уменьшить накопление жира. Было доказано, что флавоноиды, полученные из остатков семян облепихи, оказывают ингибирующее действие на ожирение с целью защиты печени.

Во время скармливания мышей высокожировой диетой в течении 60 дней, с добавлением в еду ФСО был произведен анализ мышей которые получали только высокожировую диету и группы мышей получавших высокожировую диету и флавонойды семян облепихи. Анализ биохимических показателей показал, что уровени общего холестерина в печени в группах мышей  которых кормили высокожировой диетой снижались дозозависимым образом по сравнению с контрольной группой. При исследовании было выяснено что адипоциты (жировые клетки) в печени были значительно уменьшены,  что могло значительно уменьшить жировую инфильтрацию тканей печени, вызванную диетой с высоким содержанием жиров.

Облепиха (Hippophae rhamnoides) подавляет пролиферацию клеток, ускоряет заживление ран и снижает экспрессию специфического антигена простаты в клетках рака простаты in vitro.

Исследования показали, что облепиха содержит огромный набор биологически активных соединений, таких как флавоноиды, ликопин, каротиноиды, фитостерины, органические кислоты, полиненасыщенные жирные кислоты и различные незаменимые аминокислоты в листьях, корнях, семенах и ягодах. Эти типы соединений обладают широким спектром противораковых и антиоксидантных свойств. Он также богат витаминами A, B1, B12, C, E, K и P. Флавоноиды, обнаруженные во всех частях облепихи, в основном отвечают за антиоксидантные и противораковые эффекты. Они защищают клетки от окислительного повреждения, последующей генетической мутации и, в конечном итоге, рака. Сообщалось, что листья облепихи обладают антиоксидантным и противовисцеральным действием при ожирении у мышей с ожирением, вызванным диетой, за счет регулирования их антиоксидантного и липидного метаболизма. Ряд фармацевтических препаратов и нутрицевтиков из облепихи, особенно фенольных соединений, продемонстрировали значительные преимущества в химиопрофилактике рака, и было установлено, что более высокое потребление фенольных соединений, в основном процианидинов и флавоноидов, с пищей коррелирует с более низким риск рака. Сообщалось, что экстракты облепихи эффективны против клеток рака груди человека, раковых клеток полуколонной кишки и шейки матки, аденокарцинома желудка, аденокарцинома молочной железы, аденокарцинома предстательной железы, колоректальная аденокарцинома и аденокарцинома молочной железы; Многие исследователи также смогли сообщить об ингибирующем действии экстрактов облепихи против раковых клеток печени человека, острого миелоидного лейкоза человека и клеток глиомы. Было показано, что байкалин из облепихи вызывает апоптоз в клетках рака простаты. Подробные сведения о свойствах, способствующих укреплению здоровья и профилактике рака, были хорошо задокументированы в отношении различных типов рака.

Рак предстательной железы является основным диагностированным раком среди всех видов рака и второй ведущей причиной смертности от рака у мужчин. Около 1 из 9 мужчин диагностируется рак простаты в течение жизни и почти умирает от рака простаты. В 2019 году только в США было зарегистрировано 191930 новых случаев рака простаты и 33330 смертей. Рак простаты чаще развивается у пожилых мужчин и у афроамериканцев. Примерно 6 из 10 случаев диагностированы у мужчин в возрасте 65 лет и старше, и это редко встречается у мужчин до 40 лет. Средний возраст постановки диагноза составляет около 66 лет. Предполагается, что потребление функциональных продуктов питания, обладающих эффектом против рака простаты, будет способствовать укреплению здоровья среди групп населения, подверженных более высокому риску рака простаты. На сегодняшний день не опубликовано ни одного скрининга для выявления биоактивных молекул из функциональных пищевых продуктов и лекарственных растений, способных явно и эффективно снижать ядерную локализацию AR в клетках CRPC. Однако синтетические библиотеки малых молекул были проверены на то же самое.

В исследовании библиотека соединений из 20000 экстрактов (SKICDDL) из лекарственных растений, эндогенных для Гималайского региона Индии, была протестирована на отмену GFP-меченного AR в клетках C4-2, и облепиха (Hippophae rhamnoides L.) была одной из них. Было получено шестнадцать совпадений, которые могли отменить ядерную локализацию AR в клетках C4-2. Для дальнейших экспериментов были собраны различные образцы облепихи из различных регионов Ладакха, включая трансгималайский регион Индии, и сравнительное антиоксидантное профилирование показало, что образцы, собранные в регионе Нубра (amsl 3048 м), имели самую высокую антиоксидантную активность по сравнению с коллекциями из других частей Ладакхи. Экстракты различной полярности далее использовали для скрининга, и экстракты, которые были способны устранять ядерную локализацию GFP-меченного рецептора андрогена в линии клеток устойчивого к кастрации рака простаты, были дополнительно изучены. Было обнаружено, что коктейль SKICDDL-3 (SKUAST-K Innovative Center for Drug Discovery Library Molecule No 3), извлеченный последовательно с использованием систем растворителей различной полярности из Hippophae rhamnoides L., способен ингибировать рост и пролиферацию клеток C4-2 и LNCaP in vitro. . Дальнейшие исследования показали, что SKICDDL-3 может также ингибировать заживление ран и миграцию клеток C4-2 и LNCaP in vitro. Экспрессия в реальном времени предполагает, что SKICDDL-3 может эффективно снижать простатоспецифический антиген (PSA) как в клетках LNCaP, так и в клетках C4-2 in vitro. Гены, чувствительные к андрогенам, также показывают снижение экспрессии при обработке экстрактом Hippophae rhamnoides L. SKICDDL-3. 

Известно, что натуральные продукты в виде экстрактов или чистых соединений открывают безграничные возможности для открытия новых лекарств из-за их широкой доступности. Облепиха spp. содержат ряд соединений, включая каротиноиды, токоферолы, стерины, флавоноиды, липиды, аскорбиновую кислоту и дубильные вещества. Эти соединения имеют большое значение, поскольку многие из них проявляют биологическую и терапевтическую активность, включая антиоксидантные, противоопухолевые, гепатопротекторные и иммуномодулирующие свойства. Эти соединения из различных функциональных пищевых продуктов обладают высоким нутрицевтическим и фармацевтическим потенциалом. Было показано, что сверхэкспрессия гена антоцианидинсинтазы в клубнике повышает антиоксидантную способность и цитотоксическое действие на раковые клетки печени человека. Биоактивные соединения из ягод, таких как клубника, обладают несколькими биологическими активностями, включая антиоксидантные, противовоспалительные и противораковые свойства. Черная малина также продемонстрировала сильные противовоспалительные эффекты против индуцированного NMBA онкогенеза пищевода у крыс. Роль ягод облепихи в профилактике рака груди была тщательно изучена, и несколько исследований in vitro и in vivo показали, что фенольные соединения из ягод облепихи играют жизненно важную роль в профилактике рака через различные клеточные сигнальные пути. Оценка антиоксидантной активности облепихи обычно касается ее плодов, семян и листьев. Облепиха (Hippophae rhamnoides L.) содержит флавоноиды в качестве основной фракции полифенолов, полезных для здоровья. Таким образом, облепиха может стать отличным источником биологически активных фитохимических веществ и функциональной пищи, имеющей как лечебное, так и питательное значение. Предполагается, что различные ягоды, такие как облепиха, могут способствовать профилактике и лечению рака, значительно усиливая иммунный ответ.

Лечение рака предстательной железы на ранней стадии в настоящее время представляет собой хирургическое вмешательство, химиотерапию, лучевую терапию депривацией андрогенов (ADT) или периодическую терапию депривации андрогенов (IADT). Пути передачи сигналов рецептора андрогенов (AR) и фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) играют важную роль в развитии, функционировании и гомеостазе рака простаты. Новые подходы к идентификации новых низкомолекулярных ингибиторов функции AR имеют первостепенное значение из-за необходимости ингибировать клетки CRPC, устойчивые к антиандрогенам первого и второго поколения, таким как флутамид, нилутамид, бикалутамид и недавно одобренный энзалутамид. Хотя энзалутамид ингибировал ядерный сигнал AR в клетках CRPC, ядерный сигнал AR по-прежнему оказался выше, чем сигнал цитоплазматического AR. Однако устойчивость к этим агентам в основном развивается через многофакторные механизмы. Два структурно связанных пирролоимидазола, которые могут блокировать ядерную локализацию AR в клетках CRPC, также были разработаны и идентифицированы, но синтез этих небольших молекул является довольно дорогостоящим. Кроме того, эти препараты обеспечили прорывные результаты с улучшением общей выживаемости, а также ряда значимых суррогатных конечных точек. Поэтому одной из лучших альтернатив этим антиандрогенам первого и второго поколения могут быть экстракты растений. Кроме того, перекрестные помехи между AR и другими сигнальными путями при раке простаты серьезно влияют на терапевтический результат лекарственной терапии, так что нацеливание на AR приводит к активации передачи сигналов PI3K, тогда как ингибирование пути PI3K приводит к увеличению транскрипционной активности AR. Таким образом, оба пути при нацеливании дают возможность условной летальности и высокого терапевтического индекса. Следовательно, решение проблемы отмены ядерного AR в клетках CRPC и ингибирования передачи сигналов AR/PI3K для разработки стратегии лечения рака простаты было центральной темой этого исследования, и предварительные результаты предполагают, что SKICDDL-3 может эффективно ингибировать оба пути in vitro. 

В одном из исследований проверили экстракты, полученные из Hippophae spp. собраны из различных регионов Лех-Ладакха, чтобы идентифицировать экстракты, способные ингибировать уровень ядерной AR, используя клетки C4-2 CRPC, трансфицированные GFP-AR, тем самым нацеленные на сигнальный путь AR. Используя скрининговый анализ ядерной локализации AR, было установлено, что водный экстракт листьев H. rhamnoides L., собранный из региона Нубра в Ладакхе, способен снижать уровень ядерной AR в клетках C4-2. Однако экстракты из других мест не показали такого же эффекта и могут быть дополнительно исследованы на предмет потенциальных новых молекул против рака простаты. Ингибирование AR оказалось специфическим, поскольку оказалось, что мощный экстракт не ингибирует ядерную локализацию GFP. Флуоресцентный скрининг на отмену AR-GFP широко используется для открытия новых лекарств против РПЖ, поскольку AR играет ключевую роль в прогрессировании рака простаты. Исследования, приведенные здесь, показывают, что этот мощный экстракт SKICDDL-3 представляет собой новый коктейль, направленный на AR, обладающий способностью ингибировать CRPC. SKICDDL-3 уменьшал ядерную AR и блокировал пролиферацию AR-положительных клеток рака простаты. Эти результаты согласуются с другими наблюдаемыми синтетическими молекулами, которые изменяют уровни рецепторов андрогенов в андроген-чувствительных LNCaP и устойчивых к кастрации клетках C4-2.

Результаты доказали, что предотвращение ядерной локализации AR является жизнеспособным и применимым подходом к подавлению роста AR-положительных клеток рака простаты. Хотя некоторые антагонисты AR, такие как энзалутамид, могут снижать белок AR в ядре, уровень ядерной AR все еще выше, чем цитоплазматический AR в клетках рака простаты, обработанных энзалутамидом. В  исследовании водный экстракт листьев H. rhamnoides ингибировал ядерную локализацию GFP-AR в клетках C4-2, хотя не все клетки показали отмену сигнала GFP. Было обнаружено, что ядерная АР значительно меньше, чем цитоплазматическая АР в клетках рака простаты, обработанных SKICDDL-3. Таким образом, SKICDDL-3 можно использовать для разработки биоактивных молекул в качестве потенциальной терапии для CRPC, поскольку экстракт может эффективно снижать уровень PSA, который является мощным маркером прогрессирования РПЖ in vitro. Кроме того, экстракт был способен ингибировать другие гены, чувствительные к AR, ELL2, EAF2 и CALR. SKICDDL-3 также может оказывать вредное воздействие на AR-отрицательные клетки, поскольку он ингибирует ELL2, и было показано, что ELL2 подавляет пролиферацию раковых клеток в AR-отрицательных клетках. Исследования также показали, что потеря ELL2 вызывает интраэпителиальную неоплазию предстательной железы мышей у мышей C57black. Протестировали SKICDDL-3 против клеток РПЖ (C4-2 и LNCaP) и наблюдали заметное уменьшение колониеобразующих единиц, а также миграцию раковых клеток. Существенный эффект SKICDDL-3 наблюдался в отношении ингибирования пролиферации клеток при увеличении концентрации по сравнению с соответствующим контролем. Уменьшение количества колониеобразующих единиц можно отнести к активным соединениям, содержащимся в SKICDDL-3, которые способствуют ингибированию экспрессии белка выживания рака, хотя это необходимо исследовать. Анализ образования колоний является признаком прогрессирования и выживаемости рака, и он показал снижение количества колоний при лечении SKICDDL-3.  Результаты согласуются с более ранними исследованиями, демонстрирующими, что экстракты растений обладают противораковыми свойствами, и правильная методология может использовать преимущества, связанные с этими растительными тканями. Текущее исследование показывает, что SKICDDL-3 представляет собой новый коктейль, нацеленный на AR, способный ингибировать CRPC. Мощный экстракт снижал уровни экспрессии гена-мишени AR и уменьшал пролиферацию AR-положительных клеток рака простаты. Ингибирование CRPC с помощью положительного экстракта, по-видимому, опосредовано направленной передачей сигналов AR, поскольку экстракт ингибирует пролиферацию AR-положительных клеток, LNCaP и C4-2 in vitro.

Вкратце, H. rhamnoides L., собранные в регионе Нубра в Лех-Ладакхе, проявляют самую высокую антиоксидантную активность. Кроме того, идентификация водного экстракта листьев (SKICDDL-3) H. rhamnoides L. ингибировала путь AR в клетках C4-2 и LNCaP. Предполагается, что SKICDDL-3 может ингибировать пролиферацию AR-положительных клеток, воздействуя на гены, чувствительные к андрогенам, AR, PSA, CALR, ELL2 и EAF2 in vitro. Будущие исследования позволят выявить потенциальные биоактивные молекулы из коктейля SKICDDL-3 для разработки новых вариантов лечения рака простаты. Более того, текущее исследование утверждает, что листья облепихи могут быть хорошим кандидатом в качестве функциональной пищи и могут играть ключевую роль в профилактике рака простаты у групп населения, подверженных высокому риску заболевания.